李春莉，吴珍红，缪晓青
（福建农林大学蜂疗研究所，福建省神蜂科技开发有限公司，福州，350002）
摘 要：使用不同浓度的王浆，饲喂小鼠，进行改善小鼠睡眠的药效试验。小鼠睡眠质量的判断指标主要有戊巴比妥钠睡眠潜伏期时间、延长戊巴比妥钠睡眠时间和戊巴比妥钠阈下剂量入睡率。试验结果说明，戊巴比妥钠剂量为2 g/60kg、3 g/60kg、4 g/60kg时对改善睡眠质量有一定的作用：即当蜂王浆浓度分别为0.208 g/mL、0.313 g/mL、0.417 g/mL时改善睡眠的效果较好，当蜂王浆的剂量超过0.417 g/mL时其改善睡眠的效果反而下降。
关键词：蜂王浆，睡眠质量，动物药效
The Sleeping Improving Pharmacodynamic Test of Royal Jelly
Li Chun-li , Wu Zhen-hong , Miao Xiao-qing*
(The Apitherapy Institute of FAFU , Fujian Shenfeng Science and Technology Development Co., Ltd , Fuzhou 350002 )
Abstract: The sleeping improving pharmacodynamic tests of the different concentration royal jelly (RJ) to mice were compared. The sleep quality index are the sleep delitescence time caused by pentobarbital, the extend sleep time caused by pentobarbital and the sleep rate below the threshold of pentobarbital. The results showed that the sleep quality were improved as the RJ were 2 g/60kg、3 g/60kg、4 g/60kg, which means that the RJ concentration were 0.208 g/mL、0.313 g/mL、0.417 g/mL, but when it was more than 0.417 g/mL the improving effect was not better than them.
Keywords: royal jelly (RJ), sleep quality，animal effect test
1引言
蜂王浆是工蜂上颚腺分泌的专供蜂王和蜂幼虫食用的乳白色或淡黄色的浆状物质。研究表明，鲜蜂王浆中水份约占62.5-70%，干物质约30-37.5%；干物质中蛋白质含量最多，约占36-55%，游离氨基酸约占0.8%，糖类约占据20%以上，包括10-羟基-癸烯酸等脂肪酸在内的脂类物质含量为7.5-15%，矿物质为0.9-3%。此外，蜂王浆中还含有维生素、核酸、激素等其他含量较少的物质[1-3]，有改善睡眠的作用。本文对其改善睡眠方面的作用进行研究与探讨。
2 试验材料与方法
2.1 材料
普通级昆明种小白鼠，体重25 g左右，由福建省医科大学试验动物研究中心提供；戊巴比妥钠（Sigma，纯度> 99 %）；蜂王浆，由福建省神蜂科技开发有限公司提供，其质量标准为：10-羟基癸烯酸含量≧1.6 g/100g，水分≦67.5 g/100g，无淀粉检出；
蜂王浆溶液：蜂王浆4.165 g、 6.250 g、8.333g、10.417g溶于20 mL蒸馏水配制成0.208 g/mL、0.313 g/mL、0.417 g/mL、0.521 g/mL的溶液分别用于1、2、3、4组的动物试验。
2.2 试验方法
2.2.1 动物睡眠试验分组
正常成年人每次服用3 g左右的蜂王浆就可引起睡眠[4]，即3 g/60kg。按此50倍[5]的剂量将雄性小白鼠随机分为5组（对照组ck、1组、2组、3组、4组）每组10只。
动物试验前均在实验室适应性喂养2 d，然后在自然光照，自由饮食和自由进水的条件下，喂养28 d。第30 d起每天8：00-10：00，给每组灌胃不同浓度的王浆0.2 mL。
2.2.2 药效试验
（1）戊巴比妥钠用量试验
小白鼠随机分为6组，每组10只。各组腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠，记录30 min内入睡数[6]。确定使100 %的小白鼠进入睡眠的戊巴比妥钠最小剂量，以及确定戊巴比妥钠使80 %-90 %的小白鼠翻正反射不消失的剂量即其最大阈下睡眠剂量。
（2）小白鼠的睡眠潜伏期试验
每天8：00-10：00之间，上述5组小白鼠连续灌胃25 d，第26 d灌胃15 min后，腹腔注射戊巴比妥钠溶液；从注射完成到小白鼠翻正反射消失的时间段为睡眠潜伏期。根据预试验确定使100 %的小白鼠进入睡眠的戊巴比妥钠的剂量，即50 mg/kg，每只注射0.125%戊巴比妥钠溶液0.1 mL。
（3）延长戊巴比妥钠睡眠时间的试验
每天8：00-10：00之间，将5组小白鼠连续灌胃25 d，第26 d灌胃15 min后，腹腔注射戊巴比妥钠溶液；从小白鼠翻正反射消失到小白鼠翻正反射恢复的时间段为睡眠时间。
（4）戊巴比妥钠阈下睡眠剂量试验
根据预试验确定的使10 %-20 %的小白鼠睡眠的戊巴比妥钠的阈下睡眠剂量，注射0.4 %的戊巴比妥钠溶液100 g/ml。5组小白鼠连续灌胃25 d，第26 d灌胃15 min后腹腔注射戊巴比妥钠溶液，观察30 min内小白鼠的入睡数。
（5）试验数据统计分析
试验数据均采用DPS软件分析，采用M ± SD表示，单组样本进行方差检验，并进行组间的显著性检验，比较差异显著性程度。
3 结果与分析
3.1戊巴比妥钠用量试验
表1 戊巴比妥钠不同剂量对小白鼠入睡率的影响
|
浓度
|
30mg/kg
|
35mg/kg
|
40mg/kg
|
45mg/kg
|
50mg/kg
|
55mg/kg
|
|
小白鼠数
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
10
|
|
入睡数
|
0
|
0
|
2
|
7
|
10
|
10
|
|
入睡率(%)
|
0
|
0
|
20
|
70
|
100
|
100
|
上表说明，100 %的小白鼠进入睡眠的戊巴比妥钠最小剂量为50 mg/kg；而戊巴比妥钠阈下睡眠剂量为40 mg/kg。
3.2 小白鼠的睡眠潜伏期试验结果与分析
表2 对戊巴比妥钠睡眠潜伏期的影响（M ± SD）
|
分组
|
小白鼠数
|
潜伏期时间（min）
|
5 %显著水平
|
1 %极显著水平
|
|
ck
|
10
|
3.21 ± 0.92
|
a
|
A
|
|
4组
|
10
|
3.07 ± 0.70
|
a
|
A
|
|
1组
|
10
|
2.13 ± 0.26
|
b
|
B
|
|
2组
|
10
|
1.97 ± 0.20
|
b
|
B
|
|
3组
|
10
|
1.85 ± 0.29
|
b
|
B
|
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